Гормональная диагностика по цитологическому составу влагалищной слизи у коров

Под контролем нервно – гуморальной регуляции происходит проявление полового возбуждения, рост фолликулов, развитие плода и другие значимые процессы для организма. Регуляция происходит на основе очень сложных комплексных реакций на определенные раздражители как экзогенного (внешнего), так и эндогенного (внутреннего) характера, вызывающих возникновение и смену в организме доминантных состояний [1].

Целью исследования является применение методики цитологического состава влагалищной слизи (ЦСВС) для определения гормонов в сыворотке крови у крупного рогатого скота. А также разработка более дешевого и практичного в исполнении способа гормональной диагностики, позволяющего прогнозировать плодотворное осеменение у крупного рогатого скота, выполнимого в производственных условиях.

Поставленная цель решается тем, что проводят отбор мазков слизи со слизистой оболочки эпителия влагалища и производят цитологическую оценку мазков, взятие мазка происходит перед проведением синхронизации полового цикла, а показатель уровня гормонов в сыворотке крови определяют по числу эпителиальных клеток влагалища [2].

Для реализации способа определения уровня половых гормонов в сыворотке крови у крупного рогатого скота по ЦСВС, отбирается мазок-отпечаток. Предварительно наружные половые губы обрабатываются стерильной салфеткой, ватная палочка вводится кранио-дорсально под углом 45 градусов на глубину 10 – 15 см, по верхней стенке влагалища. Полученный материал переносится на обезжиренное предметное стекло вращательно-поступальным движением, высушивается на воздухе в течение 10-15 минут.

Производится окраска мазков-отпечатков при помощи набора для быстрого окрашивания Лейкодиф - 200. После этого производится микроскопия биологического материала при увеличении 100– х, подсчитывается 100 клеток и вносится в таблицу данных. Оценивается состояние поверхностных, промежуточных и базальных эпителиальных клеток, а также состояние ядер вышеуказанных клеток: норма, кариопикноз, криорексис и кариолизис [3].

Совместно с этим производится отбор крови из подхвостовой вены при помощи вакуумных пробирок с красной насечкой с активатором свертывания крови. После чего кровь подвергается центрифугированию в течение 20 минут при 1500 оборотах, сыворотка переносится в отдельные пробирки эппендорфа. Исследование проводят по методу иммуноферментного анализа при помощи тестов ELISA Kit for Follicle Stimulating Hormone.

Составляются графики по цитологическому составу влагалищной слизи и концентрации уровня гормонов в сыворотке крови, с установлением прямой или обратной зависимости между показателями.

В эксперименте задействовано 27 голов крупного рогатого скота черно – пестрой породы, средний возраст животных 3 – 6 лет, вес 400 – 450 кг. Отбор животных в группы осуществлялся по клиническим и гематологическим показателям. Животные были вакцинированы и не болели такими заболеваниями, как: лейкоз, бруцеллез, туберкулез ПГ-3, ИРТ, РСИ, ВД [4].

Для проведения исследования сыворотки крови и цитологической оценки мазков – отпечатков, была сформирована группа животных, по следующим признакам:

• Общее состояние животного, оценка габитуса, упитанность, молочная и мясная продуктивность;
• Оценивалось состояние слизистых оболочек, цвет и влажность кожи;
• Исследовались и оценивались подчелюстные, предлопаточные и надвыменные лимфатические узлы;
• Клинические показатели общего состояния организма (температура тела 37,5—39,5с, пульс 50-80 уд/мин, дыхание 10– 30 р/мин);
• При ректальном исследование оценивалась консистенция, размер, наполненность, сокращение, тонус и расположение матки. Также особенность миометрия и расположение рогов матки;
• Состояние слизистой оболочки и выделения из влагалища, отсутствие серозных, гнойных, кровянистых выделений;
• Отсутствие заболеваний и патологий яичников, учитывалась форма, размеры и консистенция яичников;
• Производилась оценка содержания в крови кетоновых тел и учитывался уровень глюкозы;
• Состояние дистальных отделов конечностей (копыт);
• Проведение ультразвуковой диагностики репродуктивных органов матки, яичников на наличие кист [5].

1. Шадрин С.В. Повышение воспроизводства стада крупного рогатого скота путем гормональной регуляции половых циклов / С.В. Шадрин, А.В. Макаров, И.В. Шадрин. — Красноярск: Рекламно-издательский центр «Типография РИЦ», 2018.
2. Студенцов А. П., Шипилов В. С. И. др. / Акушерство, гинекология и биотехника репродукции животных: учебник для вузов — 12-е изд., стер. — Санкт-Петербург: Лань, 2022. Текст: электронный // Лань: электронно-библиотечная система. — URL: https://e.lanbook.com/book/184183.
3. Баймишев Х. Б., Баймишев М. Х.Акушерство и гинекология — Самара: СамГАУ, 2021.— Текст: электронный // Лань: электронно-библиотечная система. — URL: https://e.lanbook.com/book/183703.
4. Сборник научных трудов по материалам XXV Всероссийской (национальной) научно-практической конференции студентов, аспирантов и молодых ученых с международным участием (26 апреля – 02 июня 2023 г.) – Томск Новосибирск: ИЦ Золотой колос, 2023. –С.205 -209;
5. Послеродовой период у крупного рогатого скота: физиология и патология: [монография] / Е. В. Животягина, Л. И. Дроздова; М-во сельского хозяйства Российской Федерации, Томский сельскохозяйственный ин-т, фил. ФГОУ ВПО НГАУ, Уральская гос. сельскохозяйственная акад. - Томск  Ветер, 2008. - 113 с.